Yeni Coronavirüs(SARS-Cov-2) Nükleik Asit Tespit Kiti
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Flucevherscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Püretmekt name ]Yeni Coronavirüs(SARS-Cov-2) Nükleik Asit Tespit Kiti(Floresan RT-PCR Prob Yöntemi)
【Packaging speceğercations ]25 Test/Kit
【Intended usyaş]
Bu kit, sağlık hizmeti sağlayıcıları tarafından COVID19'dan şüphelenilen kişilerden alınan nazofaringeal sürüntülerde, orofaringeal (boğaz) sürüntülerde, ön burun sürüntülerinde, orta türbinat sürüntülerinde, burun yıkama sıvılarında ve burun aspiratlarında yeni koronavirüsten nükleik asidin kalitatif tespiti için kullanılır. Yeni koronavirüsün ORF1ab ve N genlerinin tespiti, yeni koronavirüs enfeksiyonunun yardımcı tanısı ve epidemiyolojik izlenmesi için kullanılabilir.
【Principles of the pgüldure ]
Bu kit, yeni koronavirüs (SARS-Cov-2) ORF1ab ve N gen dizileri için tasarlanmış spesifik TaqMan probları ve spesifik primerler için tasarlanmıştır. PCR reaksiyon çözeltisi, hedeflerin spesifik tespiti için 3 set spesifik primer ve floresan prob içerir ve endojen temizlik genlerinin tespiti için kitin dahili standart kontrolü olarak ek bir spesifik primer ve floresan prob seti kullanılır.
Test prensibi, spesifik floresan probun, PCR reaksiyonunda Taq enziminin ekzonükleaz aktivitesi tarafından sindirilmesi ve parçalanması, böylece raportör floresan grubu ve söndürülmüş floresan grubun ayrılması, böylece floresan izleme sisteminin bir floresan alabilmesidir. sinyali ve ardından PCR amplifikasyonunun zenginleştirme etkisi sayesinde, probun floresans sinyali belirlenmiş bir eşik değerine -Ct değerine (Döngü eşiği) ulaşır. Hedef amplikonun olmaması durumunda probun raportör grubu söndürme grubuna yakındır. Bu sırada, floresans rezonans enerji transferi meydana gelir ve raportör grubun floresansı, söndürme grubu tarafından söndürülür, böylece floresan sinyali, floresan PCR cihazı tarafından tespit edilemez.
Test sırasında reaktiflerin kullanımını izlemek için kit, pozitif ve negatif kontrollerle donatılmıştır: pozitif kontrol, hedef bölge rekombinant plazmidini içerir ve negatif kontrol, çevre kirliliğini izlemek için kullanılan Damıtılmış sudur. Test sırasında pozitif kontrolün ve negatif kontrolün aynı anda ayarlanması önerilir.
【Main components ]
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Bileşenentler | |
| isime | Spesifikasyontanımlama | miktargerçeklik | miktargerçeklik | |
| Pozitif kontrol | 180 μL/şişe | 1 | 1 | Yapay olarak oluşturulmuş plazmidler, Damıtılmış su |
| Negatif kontrol | 180 μL/şişe | 1 | 1 | Damıtılmış su |
| SARS-Cov-2 Karışımı | 358,5 μL/şişe | 1 | / | Spesifik primer çiftleri, spesifik tespit floresan probları, dNTP'ler, MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Damıtılmış su vb. |
| Enzim Karışımı | 16,5 μL/şişe | 1 | / | Taq enzimleri, ters transkriptaz, UNG enzimleri vb. |
| SARS-Cov-2 Karışımı(Liyofilize) | 25 test/şila | / | 1 | Spesifik primer çiftleri, spesifik tespit floresan probları, dNTP'ler, Taq enzimleri, ters transkriptaz, Damıtılmış su vb. |
| 2x Tampon | 375 μL/şişe | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Damıtılmış su vb. |
Not:(1) Farklı parti kitlerindeki bileşenler karıştırılamaz veya değiştirilemez.
(2) Kendi reaktifinizi hazırlayın: Nükleik asit ekstraksiyon kiti.
【Storage condişteons Ve expiration date ]
For BST-SARS-25:Uzun süre -20±5°C'de taşıyın ve saklayın.
For BST-SARS-DR-25:Oda sıcaklığında taşıma. -20±5°C'de uzun süre saklayın.
Tekrarlanan donma-çözülme döngülerinden kaçının. Geçerlilik süresi geçici olarak 12 ay olarak belirlenmiştir.
Üretim ve kullanım tarihi için etikete bakın.
Reaktif ilk açıldıktan sonra tekrarlanan donma-çözülme döngülerinin ve reaktifin dondurulma sayısının önlenmesi için -20±5 °C'de en fazla 1 ay veya reaktif periyodu sonuna kadar (hangisi önce gelirse) saklanabilir. -çözülme döngüleri 6 katı geçmemelidir.
【Applicable instrument]ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements ]
1.Uygulanabilir numune türü: Ekstrakte edilmiş nükleik asit çözeltisi.
2. Numune saklama ve taşıma: -20±5°C'de 6 ay boyunca saklayın. Numuneleri en fazla 6 kez dondurun ve çözün.
【TAvustralya, Brezilya ve Kuzey Amerika ülkelerinin kullandığı saat uygulamasıing metsaçmalık]
1.Nucleic acid extraction
Viral nükleik asidi çıkarmak için uygun bir nükleik asit ekstraksiyon kiti seçin ve ilgili kit talimatlarını izleyin. Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. tarafından üretilen bir Nükleik asit ekstraksiyon ve saflaştırma kitinin veya eşdeğer bir nükleik asit saflaştırma kitinin kullanılması tavsiye edilir.
2. Rher birition yeniden düzenlemeknt preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(1) SARS-Cov-2 Karışımı ve Enzim Karışımını çıkarın, oda sıcaklığında tamamen eritin, Vortex cihazıyla iyice karıştırın ve ardından kısa süre santrifüjleyin.
(2) 358,5uL SARS-Cov-2 Karışımına 16,5uL Enzim Karışımı eklendi ve karışık reaksiyon solüsyonunu elde etmek için iyice karıştırıldı.
(3) Temiz bir 0,2 mL PCR sekizlik tüpü hazırlayın ve bunu kuyucuk başına 15uL yukarıdaki karışık reaksiyon solüsyonuyla işaretleyin.
(4) 15 μL saflaştırılmış nükleik asit çözeltisi, pozitif kontrol ve negatif kontrol ekleyin ve sekizli tüpün kapağını dikkatlice kapatın.
(5) Baş aşağı çevirerek iyice karıştırın ve sıvıyı tüpün tabanında yoğunlaştırmak için hızla santrifüjleyin.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) Reaksiyon karışımını hazırlamak için SARS-Cov-2 Karışımına ((Liyofilize) 375ul 2x Tampon ekleyin. Pipetleyerek iyice karıştırın ve ardından kısa süre santrifüjleyin. （Reaksiyon karışımı hazırlandıktan sonra, -20°C'de -20°C'de saklanması önerilir. uzun süreli depolama.)
(2) Temiz bir 0,2 mL PCR sekizli tüp hazırlayın ve bunu kuyucuk başına 15μL reaksiyon karışımıyla işaretleyin.
(3) 15μL saflaştırılmış nükleik asit çözeltisi, pozitif kontrol ve negatif kontrol ekleyin ve sekizli tüpün kapağını dikkatlice kapatın.
(4) Baş aşağı çevirerek iyice karıştırın ve sıvıyı tüpün tabanında yoğunlaştırmak için hızlı bir şekilde santrifüjleyin.
3. PCR amphayatcation (Çalıştırma ayarları için lütfen cihazın kullanım kılavuzuna bakın.）
3. 1 PCR 8 tüpünü floresan PCR cihazının numune odasına yerleştirin ve test edilecek numuneyi, pozitif kontrolü ve negatif kontrolü yükleme sırasına göre ayarlayın.
3.2 Floresan algılama kanalı:
(1) ORF1ab geni, FAM'ın tespit kanalını seçer (Muhabir: FAM, Söndürücü: Yok).
(2) N geni VIC'in tespit kanalını seçer (Raportör: VIC, Söndürücü: Yok).
(3) Dahili standart gen, CY5'in tespit kanalını seçer (Muhabir: CY5, Söndürücü: Yok).
(4) Pasif Referans ROX olarak ayarlanmıştır.
3.3 PCR programı parametre ayarı:
| Adım | Sıcaklık(°C) | Zaman | Döngü sayısı | |
| 1 | Ters transkripsiyon reaksiyonu | 50 | 15 dakika | 1 |
| 2 | Taq enzim aktivasyonu | 95 | 2,5 dakika | 1 |
| 3 | Taq enzim aktivasyonu | 93 | 10 saniye | 43 |
| Tavlama uzatması ve floresans edinimi | 55 | 30 saniye | ||
Ayarladıktan sonra dosyayı kaydedin ve reaksiyon programını çalıştırın.
4.Results analysis
Program bittikten sonra sonuçlar otomatik olarak kaydedilir ve amplifikasyon eğrisi analiz edilir. Amplifikasyon eğrisi cihazın varsayılan eşiğine ayarlanır.
【Explanation of test result ]
1. Deneyin geçerliliğini belirleyin: Pozitif kontrol FAM, VIC kanalı tipik bir amplifikasyon eğrisine sahip olmalıdır ve Ct değeri genellikle 34'ten azdır ancak farklı cihazların farklı eşik ayarları nedeniyle dalgalanabilir. Negatif kontrol FAM, VIC kanalı güçlendirilmemiş Ct olmalıdır. Yukarıdaki şartların aynı zamanda karşılanması gerektiği kabul edilmiştir, aksi halde bu test geçersizdir.
2. Sonuç kararı
| FAM/VIC kanalı | Karar sonucu |
| Ct<37 | Numune testi olumlu |
| 37≤Ct＜40 | Amplifikasyon eğrisi S şeklindedir ve şüpheli örneklerin yeniden incelenmesi gerekir; Yeniden inceleme sonuçları tutarlı ise olumlu, aksi takdirde olumsuz olarak değerlendirilir. |
| Ct≥40 Veya Amplifikasyon Yok | Numune testi negatif (veya kit tespitinin alt sınırının altında) |
Not: ( 1) Hem FAM kanalı hem de VIC kanalı aynı anda pozitif ise SARS-Cov-2 pozitif olarak belirlenir.
(2) FAM kanalı veya VIC kanalı pozitif, diğer kanal negatif ise test tekrarlanmalıdır. Aynı zamanda pozitif ise SARS-Cov-2 pozitif, aksi durumda SARS-Cov-2 negatif olarak değerlendirilecektir.
İlgili ürünler
-
COVİD-19 IgM/IgG Antikor Tespit Kiti
COVID-19 IgM/IgG Antikor Tespit Kiti （Kolloidal Altın İmmünokromatografi Yöntemi) Ürün Kılavuzu 【ÜRÜN ADI】COVID- 19 IgM/IgG Antikor Tespit Kiti （Kolloidal Altın İmmünokromatografi Yöntemi) 【PAKETLEME ÖZELLİKLERİ】 1 Test/Kit, 10 Test/Kit 【 ÖZET】 Yeni koronavirüsler β cinsine aittir. COVİD-19 akut solunum yolu enfeksiyonu hastalığıdır. İnsanlar genellikle duyarlıdır. Şu anda, yeni koronavirüsün bulaştığı hastalar ana kaynaktır.
-
Nükleik Asit Ekstraksiyon veya Saflaştırma Kiti
Nükleik Asit Ekstraksiyon veya Saflaştırma Kiti veya -20°C'de saklanır. Numune 0°C'de kıvrılma kullanılarak taşınmalıdır. Giriş Nükleik Asit Ekstraksiyon veya Saflaştırma Kiti (Manyetik Boncuk Yöntemi), otomatik nükleik asit ekstraksiyon aletleri kullanılarak vücut sıvılarından (sürüntüler, plazma, serum gibi) RNA ve DNA'nın otomatik olarak saflaştırılması için tasarlanmıştır. Manyetik parçacık teknolojisi, uygun yüksek kaliteli DNA/RNA sağlar ...
-
SARS-CoV-2 Antijen Test Kiti (İmmunokromatogr...
SARS-CoV-2 Antijen Test Kiti （İmmünokromatografi Yöntemi) Ürün Kılavuzu 【ÜRÜN ADI】SARS-CoV-2 Antijen Test Kiti （İmmünokromatografi Yöntemi) 【PAKETLEME ÖZELLİKLERİ】 1 Test/Kit 【ÖZET】 Yeni koronavirüsler β cinsine aittir. COVİD-19 akut solunum yolu enfeksiyonu hastalığıdır. İnsanlar genellikle duyarlıdır. Şu anda, yeni koronavirüs ile enfekte olan hastalar ana...
-
SARS-CoV-2 Antijen Test Kiti
SARS-CoV-2 Antijen Test Kiti （İmmünokromatografi Yöntemi) Ürün Kılavuzu 【ÜRÜN ADI】SARS-CoV-2 Antijen Test Kiti （İmmünokromatografi Yöntemi) 【PAKETLEME ÖZELLİKLERİ】 1 Test/Kit, 25Test/Kit, 100Test/Kit 【ÖZET】 Yeni koronavirüsler β cinsine aittir. COVİD-19 akut solunum yolu enfeksiyonu hastalığıdır. İnsanlar genellikle duyarlıdır. Şu anda, yeni koronavirüs ile enfekte olan hastalar enfeksiyonun ana kaynağıdır; asemptomatik enfekte kişiler...